欧美日韩一二区,日韩欧美国产一区二区粉嫩,九九热最新免费在线观看,亚洲精品第一页

咨詢熱線

15000266580

當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素之一細(xì)胞消化

細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素之一細(xì)胞消化

更新時(shí)間:2016-08-26      點(diǎn)擊次數(shù):3242

1. 絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可。去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。


2.細(xì)胞如何算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成*分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至*吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好。


3.EDTA的作用。胰酶切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過(guò)螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA

4.PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見(jiàn)的操作,因?yàn)檠逯?/span>含有抑制胰酶的蛋白。對(duì)于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含CaMg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制胰酶的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。

聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號(hào)7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復(fù)祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號(hào):滬ICP備10013034號(hào)-2     sitemap.xml
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸
日日噜噜夜夜狠狠久久丁香五月 | 一本一道久久综合狠狠老| 大胸美女视频| 国产成a人亚洲精v品久久网| 欧美大荫蒂av高潮| 国产JIZZ中国JIZZ免费看| 成人欧美一区二区三区在线观看| 人妻熟女一二三区夜夜爱| 磁力搜索-bt天堂| 日韩精品无码免费专区午夜不卡| 精品亚洲AV无码国产一区在线| 汤芳人体艺术| 中国熟妇色xxxx欧美老妇多毛| jizzjizz欧美69巨大| 久久九九精品国产综合喷水| 帅气体育生GARY网站MV视频| 久久久精品波多野结衣| babes性欧美| 在线精品免费视频无码的| 亚洲国产一区二区A毛片| 一本一道av无码中文字幕﹣百度 | 特级bbbbbbbbb视频| 小sb几天没做sao死了| 欧美牲交a欧牲交aⅴ久久| 国产99久久精品一区二区| 国产精品久久久久一区二区三区| 国产啪亚洲国产精品无码| 国产精品美女久久久久久久| 成 人 免费 黄 色 网站视频| 四虎影视在线影院在线观看| 日本韩国三级观看| 精品人妻无码专区中文字幕| 青楼SAO货养成日记H| 日韩大片高清播放器| 成人乱短篇500章小说| 人妻少妇AV中文字幕乱码 | 人妻人人做人做人人爱| gogo全球专业高清摄影| 久久久久久久久久久精品| 国产午夜av无码无片久久96| 为什么日本片好看|